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“PfuDNA聚合酶”参数说明
| 类别： | 分子生物学工具酶 | 延伸速率： | 0.5kb/min |
| 扩增片段长度： | 12kb | 用途1： | 高保真PCR |
| 用途2： | 平末端PCR克隆 | 保真度vstaq： | 6× |
“PfuDNA聚合酶”详细介绍
概述：
Pfu DNA聚合酶是从克隆有Pyrococcus furiosus DNA聚合酶基因的大肠杆菌中分离出来的。Pfu DNA聚合酶有3′→5′外切酶的活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错误，是目前已发现的所有天然耐热DNA聚合酶中出错率最低的(1)。
来源：
E.coli菌株，包含有从Pyrococcus furiosus中克隆的基因(2)。
应用：
1. 常规PCR。
2. 基因的高保真PCR，克隆和表达。
3. 反转录PCR (RT-PCR)。
4. 平末端PCR克隆。
5. 定点突变。
反应条件：
10× Pfu DNA聚合酶反应缓冲液 (包括 20 mM MgSO4) [200 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25°C)，100 mM (NH4)2SO4，100 mM KCl，1 mg/ml无核酸酶活性的BSA，1% Triton X-100 (V/V)，20 mM MgSO4]。
质量检测:
核酸外切酶活性：在50 μl反应体系中，10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
核酸内切酶活性：在50 μl反应体系中，10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
纯度：经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于95%。
质保声明：
Pfu DNA聚合酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
在72°C下反应30分钟，能催化10 nmol的dNTPs聚合为多核苷酸片段的酶量定义为1个活性单位 (U)。
参考文献:
1. Lunberg, K.S. et al. 1991. High-fidelity amplification using a thermostable DNA polymerase isolated fromPyrococcus furiosus. Gene. 108:1-6.
2. Sambrook, J. et al. 2001. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (3rd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press.
Pfu DNA聚合酶是从克隆有Pyrococcus furiosus DNA聚合酶基因的大肠杆菌中分离出来的。Pfu DNA聚合酶有3′→5′外切酶的活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错误，是目前已发现的所有天然耐热DNA聚合酶中出错率最低的(1)。
来源：
E.coli菌株，包含有从Pyrococcus furiosus中克隆的基因(2)。
应用：
1. 常规PCR。
2. 基因的高保真PCR，克隆和表达。
3. 反转录PCR (RT-PCR)。
4. 平末端PCR克隆。
5. 定点突变。
反应条件：
10× Pfu DNA聚合酶反应缓冲液 (包括 20 mM MgSO4) [200 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25°C)，100 mM (NH4)2SO4，100 mM KCl，1 mg/ml无核酸酶活性的BSA，1% Triton X-100 (V/V)，20 mM MgSO4]。
质量检测:
核酸外切酶活性：在50 μl反应体系中，10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1 μg的Hind III消化的λDNA于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
核酸内切酶活性：在50 μl反应体系中，10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1 μg的pUC19质粒于37°C温育4小时，电泳条带无明显变化。
纯度：经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于95%。
质保声明：
Pfu DNA聚合酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
在72°C下反应30分钟，能催化10 nmol的dNTPs聚合为多核苷酸片段的酶量定义为1个活性单位 (U)。
参考文献:
1. Lunberg, K.S. et al. 1991. High-fidelity amplification using a thermostable DNA polymerase isolated fromPyrococcus furiosus. Gene. 108:1-6.
2. Sambrook, J. et al. 2001. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (3rd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press.